關(guān)于生物化學(xué)檢測試劑盒的反應原理你了解嗎？

　　生物化學(xué)檢測試劑盒采用微生物方法，在微孔板種定量檢測食品、藥品和飼料中的生物素總量(包括添加和原生生物素)。所有所需的試劑均包含在試劑盒中。本試劑盒共能提供96次檢測(包括標準品)。使用ELISA reader (610 - 630 nm 或者540 - 550 nm)進(jìn)行讀數。
 

　　生物化學(xué)檢測試劑盒的反應原理：
 

　　對于延遲區來(lái)講，無(wú)規律可尋，對于指標檢測沒(méi)有意義。
 

　　等速區對應的指標檢測方法是速率法。速率法又稱(chēng)連續監測法，是在測定酶活性或用酶法測定代謝產(chǎn)物時(shí)，連續選取時(shí)間-吸光度曲線(xiàn)中線(xiàn)性期內4個(gè)以上測光點(diǎn)作為讀數點(diǎn)，并以單位時(shí)間吸光度變化值計算結果。線(xiàn)性期就是此期間內各測光點(diǎn)之間的吸光度差值相等，此線(xiàn)性期對酶促反應的底物來(lái)說(shuō)屬于零級反應。其測光點(diǎn)一般設置在加入啟動(dòng)因子并孵育一段時(shí)間后開(kāi)始，持續1-3min，一般應用于酶類(lèi)項目，可以使用因數法來(lái)計算待測濃度。
 

　　過(guò)渡區對應是固定時(shí)間法，是終點(diǎn)法中存在一種特殊情況，指在時(shí)間-吸光度曲線(xiàn)上選擇兩個(gè)讀數點(diǎn)，此兩點(diǎn)既非反應初始吸光度亦非平衡點(diǎn)吸光度，這兩點(diǎn)的吸光度差值用于結果計算。目的是解決某些化學(xué)反應的非特異性問(wèn)題，提高準確度。
 

　　平衡區對應的是終點(diǎn)法，按測光點(diǎn)的個(gè)數分為：一點(diǎn)終點(diǎn)法、兩點(diǎn)終點(diǎn)法。
 

　　一點(diǎn)終點(diǎn)法是指在反應到達平衡點(diǎn)，即在時(shí)間-吸光度曲線(xiàn)上吸光度不再改變時(shí)，選擇一個(gè)測光點(diǎn)計算待測物質(zhì)濃度。
 

　　兩點(diǎn)終點(diǎn)法常應用于雙試劑的測定項目中，多數一試劑通常只含緩沖液等成分，它與樣本一般不起特異性反應;因此在二試劑加入前，選擇一個(gè)測光點(diǎn)作為一讀數點(diǎn)，此時(shí)的吸光度相當于樣品空白。加入二試劑后待測物質(zhì)起反應，并經(jīng)過(guò)一定時(shí)間反應到達平衡點(diǎn)，此時(shí)選擇二個(gè)讀數點(diǎn)，兩讀數點(diǎn)吸光度之差用于計算待測物質(zhì)濃度。
 

　　兩點(diǎn)法能有效消除樣品溶血、黃疸、脂濁等造成的光吸收干擾。如：酶法測定葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐，以及化學(xué)法測定總蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、鈣、磷、鎂、鐵等;并且都能在加入二試劑后的2-5 min內達到反應終點(diǎn)。