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技術(shù)文章

抗dsRNA單克隆抗體知多少!

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  抗dsRNA單克隆抗體主要用于一些特殊的檢測。K2抗體主要用于ELISA和夾心法ELISA實(shí)驗,一般來(lái)說(shuō),K2抗體只能用于檢測IgG(IgG2a)亞型抗體不適合的雙鏈RNA(dsRNA)。
 
  抗dsRNA單克隆抗體的特性:
 
  1.高度特異性  單克隆抗體只針對一個(gè)表位,一個(gè)表位一般只有4一7個(gè)氨基酸,故單克隆抗體發(fā)生交叉反應的機會(huì )很少,即高度特異性。但這種專(zhuān)一性也不是的。在相似的抗原之間,其特異性具有濃度依賴(lài)性,即當抗體的濃度達到一定的程度后,其特異性可有所降低。單克隆抗體用于免疫酶染色、免疫熒光分析、放射免疫分析以及酶聯(lián)免疫吸附分析時(shí),其反應強度不如多克隆抗體,但其特異性?xún)?yōu)于多克隆抗體。此外,應用單克隆抗體時(shí)對抗原的保存要求也更加嚴格。例如,某些固定方法可使抗原的特定表位失去抗原性而產(chǎn)生陰性結果。
 
  2.高度的均一性和可重復性  單克隆抗體是由單個(gè)細胞株產(chǎn)生的均一性抗體。只要長(cháng)期保持雜交瘤細胞的穩定性,不發(fā)生突變,就可以長(cháng)期獲得同質(zhì)的單克隆抗體,單克隆抗體僅具有單一的生物功能。
 
  3.弱凝集反應和不呈現沉淀反應  單克隆抗體與抗原反應(除非抗原上有較多的同一表位)不呈現沉淀反應,這是因為抗單一抗原決定簇表位的單克隆抗體不易形成三維晶格結構之故。由于單克隆抗體對細胞的凝集作用較多克隆抗體弱,所以單克隆抗體的細胞毒作用也較弱。其細胞毒作用不僅取決于單克隆抗體的種類(lèi),而且取決于抗原決定簇在細胞表面的分布。兩種或兩種以上的單克隆抗體可使細胞表面的抗原表位集中,并使其細胞毒的作用加強。
 
  4.對環(huán)境敏感性  單克隆抗體易受環(huán)境的pH、溫度和鹽類(lèi)濃度的影響,使其活性降低甚至喪失,但單克隆抗體遇熱后的聚合作用很低。已證明56~C、5min可使單克隆抗體失活,小鼠血清可能有一定的保護作用,兩種單克隆抗體的混合物也可使其耐熱性加強??傊?,單克隆抗體越純對溫度越敏感,而雜蛋白及其他抗體分子可使單克隆抗體的耐熱性增強。單克隆抗體受pH的影響較多克隆抗體明顯,其*的pH為6~8,而且抗體越純對pH越敏感。低濃度的NaCl對單克隆抗體可能有一定的保護作用。
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