植物病原體包括真菌,細菌,線(xiàn)蟲(chóng)和病毒,所有可導致疾病癥狀并顯著(zhù)降低生產(chǎn)力,質(zhì)量甚至導致植物死亡的生物。病原菌可以多種方式引入并傳播到宿主植物中。細菌和真菌孢子可以通過(guò)風(fēng),雨傳遞,也可以通過(guò)雨水從土壤中轉移到植物組織中。當昆蟲(chóng)以被感染的宿主植物為食,再以未感染的植物為食并進(jìn)食時(shí),它們可以作為病原體感染植物的媒介。病原體還可以通過(guò)受感染的種子,移植或受污染的設備,灌溉用水和人類(lèi)等方式傳播。
1.單一病原體的實(shí)驗室檢測產(chǎn)品
病毒性病原菌檢測,采用的是DAS-ELISA方法。
細菌性病原菌檢測,多采用的是IIF(間接法免疫熒光),部分采用IF或DSA-ELISA法
2.多種病原體的實(shí)驗室檢測產(chǎn)品
Prime Diagnostics有兩種多重檢測產(chǎn)品線(xiàn),一個(gè)為L(cháng)uminex xMAP,基于蛋白的檢測系統。二個(gè)為基于DNA或RNA的檢測系統。
(1)LuminexxMAP?多重檢測
Luminex Xmap——基于顏色編碼順磁微球的多重檢測系統
特異的抗體與這些順磁微球結合,病毒或是細菌等植物病原體與之結合。激光分析器檢測與病原體結合的熒光標記二抗。這一技術(shù)能同時(shí)有效檢測多達百種病原體。
使用Flexmap 3D analyzer,LuminexxMAP?可同時(shí)分析多達500個(gè)參數。通過(guò)組合不同的特異抗原,Prime Diagnostics提供多種不同的組合方式用于多重分析,Prime Diagnostics的Luminexx MAP?試劑盒性能已經(jīng)檢測證實(shí)。
樣品中的病原體在微球表面實(shí)現檢測:微球添加入96孔板的樣品中,每一種微球特異性結合其特異的靶標分子(抗體),加入二抗,經(jīng)結合標記,分析儀上檢測,分析儀通過(guò)分析樣品內部染料確定微球。
該多重檢測技術(shù)省時(shí)省力。
動(dòng)植物病原體檢測試劑盒的原理:
xMAP技術(shù)基于聚苯乙烯微球或是柱子。其根據顏色的編碼特異辨認每種微球。
結合一個(gè)病原體的抗體與特異柱子結合,生成特異的抗體結合柱。
這些特異組合組在一起,在單一樣中檢測一組不同的病原體。
連接抗體結合病原體,沒(méi)有相應病原體的話(huà),則沒(méi)有東西結合上來(lái)。
加入熒光探針連接的二抗,由柱子、病原體和抗體形成的三明治,經(jīng)分析儀分析獲取。clip_image002.gif
(2)LuminexMagPlex-TAG?多重檢測系統
為了檢測植物真菌、細菌、病毒和類(lèi)病毒的DNA或RNA,Prime Diagnostics選擇了基于靶標特異性引物延伸(Target Specific Primer Extension,TSPE)方法。TSPE將PCR與Luminex MagPlex-TAG?的多重檢測能力結合,旨在在免疫檢測不適合或應用受限的情況下檢測病原體DNA/RNA。