如何選擇一款適合自己的熒光定量PCR儀

　　在購買(mǎi)定量PCR儀的時(shí)候要根據實(shí)驗實(shí)的需要來(lái)選擇不同通量的儀器。目前市面上的熒光定量PCR的檢測通量小到16個(gè)多到384個(gè)。如果進(jìn)行一般的基因表達研究或病原體檢測，實(shí)在不必購買(mǎi)昂貴的儀器，96孔的通量足夠用；需要尋找要新藥靶點(diǎn)和疾病標記的實(shí)驗室可以考慮購買(mǎi)384孔板的儀器。假如經(jīng)費有限無(wú)法購買(mǎi)384孔板儀器的實(shí)驗室，可以考慮購買(mǎi)運行速度快（帶有FAST模塊）的96孔板熒光定量PCR儀。

　　2、硬件設計特點(diǎn)

　　熒光定量PCR儀主要有傳統的96孔板式、創(chuàng )新的離心式等，每種設計都有它的獨到之處但也都有無(wú)法避免的缺憾。

　　傳統的96孔板的熒光定量PCR可以容納的樣本量大，而且無(wú)需特殊的耗材。有些傳統的96孔板的儀器采用鹵鎢燈激發(fā)、CCD檢測，這些光學(xué)結構在96孔板的頂部，每個(gè)樣品孔距光源和檢測器的光程各不相同——邊緣效應，對結果產(chǎn)生影響。為了保證、準確的實(shí)驗結果，這類(lèi)儀器在實(shí)驗過(guò)程中通常會(huì )使用ROX（一種熒光染料）或的Reference dye作為參照校正實(shí)驗結果。鹵鎢燈的使用壽命短、更換成本較高已經(jīng)成為很多用戶(hù)頭痛的問(wèn)題。在實(shí)驗過(guò)程中鹵鎢燈作為一種熱光源，產(chǎn)生較多熱能對實(shí)驗結果有一定的影響。CCDzui大的優(yōu)點(diǎn)就是可以同時(shí)掃描所有樣品中的熒光信號，但是靈敏度較低，而且同時(shí)檢測樣品間的熒光信號存在干擾。像ABI、Bio-rad 公司生產(chǎn)的熒光定量PCR就屬于這一種。但Bio-rad的IQ系列熒光定量PCR帶有梯度功能。

　　創(chuàng )新的離心式的儀器通常選用LED激發(fā)、PMT檢測，離心式的設計上避免了邊緣效應。LED光源是冷光源對實(shí)驗沒(méi)有影響，因此無(wú)需采用其他熒光染料校正儀器，而且使用壽命長(cháng)無(wú)需經(jīng)常更換。PMT每次只能收集單個(gè)熒光信號，但是檢測靈敏度高。但這類(lèi)儀器運行速度非?？?，但也存在樣本量小、耗材昂貴、沒(méi)有梯度功能、存在時(shí)間積分等缺點(diǎn)。